Habari

Javascript imezimwa kwa sasa kwenye kivinjari chako.Baadhi ya vipengele vya tovuti hii havitafanya kazi ikiwa JavaScript imezimwa.
Sajili kwa maelezo yako mahususi na dawa mahususi inayokuvutia, na tutalingana na maelezo unayotoa na makala katika hifadhidata yetu pana na kukutumia nakala ya PDF mara moja.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Idara ya Magonjwa ya Kuambukiza, Hospitali Shirikishi ya Chuo Kikuu cha Suzhou, Mji wa Suzhou, Mkoa wa Jiangsu, 215000 Tel.uvimbe wa mfumo wa usagaji chakula na maisha ya jumla ya miaka 5 ya 14.1%.Wagonjwa wengi walio na HCC hugunduliwa katika hatua ya juu, kwa hivyo uchunguzi wa mapema ni muhimu ili kupunguza vifo kutoka kwa HCC.Mbali na viashirio vya utambuzi vinavyotumika kawaida kama vile serum alpha-fetoprotein (AFP), lectin-reactive alpha-fetoprotein (AFP-L3), na prothrombin isiyo ya kawaida (prothrombin ya upungufu wa vitamini K, II, PIVKA-II), mbinu za biopsy ya maji. Imeonekana kuwa ya thamani ya uchunguzi katika ugunduzi wa HCC.Ikilinganishwa na taratibu za uvamizi, biopsy ya maji inaweza kugundua metabolites mbaya zinazozunguka.Mbinu za biopsy ya maji hutambua seli za uvimbe zinazozunguka, DNA ya uvimbe inayozunguka, RNA inayozunguka, na exosomes na hutumiwa kwa uchunguzi wa mapema, utambuzi, na tathmini ya ubashiri ya HCC.Makala haya yanakagua baiolojia ya molekuli na utumiaji wa mbinu mbalimbali za biopsy ya maji ili kutenga alama za viumbe zinazoahidi ambazo zinaweza kuwa chaguo zinazofaa za kutathminiwa mapema kwa HCC ili kuboresha uchunguzi wa mapema wa vikundi vya HCC vilivyo hatarini zaidi.Maneno muhimu: mbinu ya biopsy ya maji, saratani ya hepatocellular, kikundi cha hatari.
Hepatocellular carcinoma (HCC) ni uvimbe mbaya wa kawaida wa njia ya usagaji chakula, ikishika nafasi ya sita kati ya visa vipya vya uvimbe mbaya kwa wanaume na wanawake.1 Ulimwenguni kote, saratani ya ini ni sababu ya tatu ya vifo vya saratani baada ya saratani ya mapafu na utumbo mkubwa, ikichukua 8.3% ya vifo vinavyohusiana na saratani kutoka kwa neoplasms zote mbaya.1 Utabiri wa HCC unahusiana kwa karibu na hatua ya utambuzi.Sababu kuu za maisha duni katika HCC ni metastases ndani ya hepatic, thrombi ya uvimbe wa vena lango, na metastasi za mbali zinazozuia kukatwa tena, na nyingi za sifa hizi tayari zipo kwa wagonjwa wakati wa utambuzi.
Kulingana na miongozo ya uchunguzi na matibabu, sababu kuu za hatari ya kupata HCC ni ugonjwa wa ini, ugonjwa sugu wa hepatitis B (HBV) au virusi vya hepatitis C (HCV), ugonjwa wa ini yenye mafuta mengi, na ugonjwa wa ini usio na ulevi (NAFLD). )2 Zaidi ya hayo, sababu za hatari kwa HCC ni pamoja na ulaji wa chakula kilichochafuliwa na aflatoxin, kichocho, visababishi vingine vya ugonjwa wa cirrhosis, historia ya familia ya saratani ya ini, kisukari, kunenepa kupita kiasi, kuvuta sigara, na kuumia kwa ini kutokana na dawa za kulevya.Vikundi vilivyo katika hatari kubwa ya umri wa miaka 35 na 45 vinapaswa kuchunguzwa mara kwa mara.Uchunguzi wa mapema ni mkakati muhimu wa matibabu ya mapema ili kuboresha maisha ya jumla ya wagonjwa walio na HCC.
Alama za viumbe kama vile AFP, AFP-L3 na PIVKA-II zinapendekezwa kwa uchunguzi wa mapema wa HCC3,4.Mbinu za biopsy ya kioevu zimeonyesha matokeo ya kuahidi katika utambuzi wa mapema na tathmini ya matibabu.5,6 Maendeleo makubwa yamefanywa katika biopsy kioevu ya HCC, ambayo inaweza kuwa na unyeti wa juu na umaalum kuliko vialamisho vya seramu vinavyotumika kawaida kama vile AFP (Jedwali 1).
AFP ni alama ya kibayolojia inayotumika sana katika HCC na kwa sasa ndiyo alama ya kibayolojia yenye maelezo mengi zaidi inayotumiwa sana kwa uchunguzi wa mapema, utambuzi, na tathmini ya ugonjwa huo.Kiwango cha juu cha AFP kinachoendelea kinachukuliwa kuwa sababu ya hatari kwa maendeleo ya HCC.7,8 Kiwango cha ugunduzi wa kansa ndogo ya hepatocellular (sHCC) inaongezeka pamoja na maendeleo ya ultrasound na tomografia ya kompyuta, na AFP imegunduliwa kuwa isiyojali hasa katika ugunduzi wa hHCC katika mazoezi ya kliniki.Kulingana na utafiti wa nyuma wa vituo vingi9, chanya ya AFP ilipatikana katika 46% (616/1338) ya kesi za HCC na 23.4% (150/641) ya kesi za sHCC.Kwa kuongezea, viwango vya AFP vimeinuliwa kwa wagonjwa walio na ugonjwa sugu wa ini na cirrhosis.10 Kwa hivyo, AFP ina athari ndogo ya uchunguzi wa sHCC.11 Kulingana na Miongozo ya Mazoezi ya Kliniki ya Asia-Pacific kwa Hepatocellular Carcinoma, matumizi ya AFP hayapendekezi.12 Ushahidi wa kimatibabu unaonyesha kuwa PIVKA-II ni bora kuliko AFP katika matibabu ya HCC na kwamba mchanganyiko wa PIVKA-II na AFP ina thamani ya juu ya uchunguzi katika HCC.13 Ikilinganishwa na biopsy ya tishu, biopsy ya kiowevu hutambua metabolites zinazohusiana na uvimbe katika viowevu vya mwili (damu, mate, kiowevu cha pleura, ugiligili wa ubongo, au mkojo) na haivamizi sana tishu.14 Kwa kuongeza, biopsies ya kioevu inaweza kuonyesha vipengele vibaya ambavyo havipo katika tishu za msingi za tumor.15 Biopsies ya kioevu bado haijajaribiwa katika mazoezi ya kliniki kwa aina zote za uvimbe, lakini uwezo wao wa uchunguzi katika saratani unavutia tahadhari ya onkolojia.16 Biopsy ya maji inaweza kugundua seli za uvimbe zinazozunguka (CTCs), DNA ya uvimbe inayozunguka (cDNA), inayozunguka RNA (ecRNA), na exosomes.Katika makala haya, tutajadili sifa, jukumu, na matumizi ya mbinu mbalimbali za biopsy ya maji katika uchunguzi wa mapema wa vikundi vya hatari vya HCC.
DNA ya ziada (cfDNA) katika sampuli za damu kutoka kwa watu wenye afya ilielezewa kwa mara ya kwanza mwaka wa 1948 na Mandel et al.17 cfDNA ni kipande cha DNA kisicho na seli takriban 160-180 kwa urefu, kinachotoka hasa kutoka kwa lymphocytes na seli za myeloid.ctDNA ni kipande mahususi cha DNA inayobadilika inayotolewa na seli za uvimbe kwenye damu ya pembeni, ambayo inawakilisha taarifa za jeni za seli za uvimbe baada ya michakato fulani ya kisababishi magonjwa, ikiwa ni pamoja na nekrosisi, apoptosis na utokaji.Sehemu ya ctDNA katika jumla ya cfDNA inatofautiana sana na aina ya uvimbe, na vipande vya cDNA vinaripotiwa kuwa kwa kawaida chini ya 167 bp kwa urefu.18 Utafiti wa Underhill ulionyesha kuwa vipande vya cfDNA kwa ujumla ni vifupi kuliko cfDNA ya kawaida.19 Ikilinganishwa na watu wenye afya njema, urefu wa jumla wa vipande vya cfDNA katika damu ya wagonjwa wa saratani ni mfupi, hivyo cfDNA inaweza kutumika kama kiashirio cha uchunguzi wa uvimbe wa mapema.Uboreshaji wa baadhi ya vikundi vidogo vya urefu wa vipande vya cfDNA vinaweza kuboresha utambuzi wa cDNA inayohusishwa na uvimbe mnene usio na metastatic.Uchunguzi umeonyesha kuwa ctDNA hupatikana katika zaidi ya 75% ya saratani za kongosho, koloni, kibofu, utumbo, ini, ovari, matiti, melanoma, na kichwa na shingo.20,21 Hata hivyo, kiasi cha ctDNA katika damu kinategemea eneo la uvimbe.22 Katika utafiti wa Bettegoud, wagonjwa walio na saratani ya utumbo mpana, matiti, ini, mapafu na tezi dume waligunduliwa kuwa na viwango vya juu vya cDNA katika damu yao kuliko saratani zingine.Kinyume chake, kwa wagonjwa walio na saratani ya mdomo, saratani ya kongosho, saratani ya tumbo na glioma, ukolezi wa cDNA katika damu ulikuwa chini.ishirini na moja
Kwa sababu ctDNA ina mabadiliko ya kijeni sawa na seli za msingi za uvimbe, cDNA inaweza kutumika kugundua mabadiliko tofauti tofauti ya uvimbe na mabadiliko ya epijenetiki, ikiwa ni pamoja na methylation, hydroxymethylation, tofauti za nukleotidi moja, na tofauti za nambari za nakala.ishirini na tatu
DNA methylation ni mojawapo ya mabadiliko ya kawaida ya epigenetic inayosababisha ukandamizaji wa jeni.Ikilinganishwa na seli za kawaida, kuna tofauti katika kiwango cha jumla cha methylation ya genome ya seli ya tumor, hasa katika methylation ya jeni za kukandamiza tumor, ambayo inaweza kugunduliwa katika hatua ya awali, na kupendekeza kuwa mabadiliko katika methylation ya DNA inaweza kuwa kiashiria cha mapema. utambuzi wa tumorigenesis.Jeni za kukandamiza uvimbe zinazohusishwa na HCC zinaweza kuamilishwa na uboreshaji wa methylation, na hivyo kuchochea tumorigenesis.24 Methylation ya DNA ni kiashirio bora cha utambuzi wa mapema wa vivimbe kutokana na umaalumu wake wa tishu, kutambulika, na uhuru wa umri.Kwa kuongeza, methylation ya DNA ni ya kawaida zaidi ikilinganishwa na mabadiliko ya somatic kwa sababu kuna maeneo zaidi ya lengo na maeneo kadhaa ya CpG yaliyobadilishwa katika kila eneo la jenomu lengwa.25 Mbali na tovuti nyingi za CpG, idadi kubwa ya loci huru ya hypermethylated katika ctDNA imetambuliwa katika DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1, na RGS10.26 Xu et al.Ulinganisho wa sampuli za cfDNA kutoka kwa wagonjwa 1098 wa HCC na udhibiti wa afya 835 ulikuwa jeni zinazohusiana na HCC zilionekana kuhusishwa sana na saini za methylation ya plasma ya cDNA.25 Kulingana na uchanganuzi wa kimaabara, modeli ya ubashiri ilitengenezwa ikiwa na alama 10 za methylation zenye unyeti na umaalum wa 85.7% na 94.3%, mtawalia, na alama hizi zilihusiana sana na wingi wa uvimbe, hatua ya uvimbe, na mwitikio wa matibabu.Matokeo haya yanaonyesha kuwa matumizi ya alama za cDNA methylation ina ahadi kubwa katika utambuzi, ufuatiliaji, na ubashiri wa HCC.Katika modeli ya methylation inayojumuisha jeni tatu za methylated (APC, COX2, RASSF1A) na miRNA moja (miR203) iliyotolewa na Lu et al27, unyeti na umaalumu wa modeli ya 27 ya kugundua HCC inayohusishwa na HBV ililinganishwa.80%.Kwa kuongezea, mfano huo unaweza kugundua 75% ya wagonjwa wa HCC ambao hawajatambuliwa na kiwango cha AFP cha 20 ng/mL.Jeni la familia ya kikoa kinachohusishwa na Ras 1A protini (RASSF1A) ni mlolongo mkuu unaojirudiarudia wa DNA katika jenomu la binadamu.Araujo na wenzake.alihitimisha kwamba hypermethylation ya mkuzaji wa RASSF1A inaweza kuwa alama ya biomarker muhimu kwa uchunguzi wa mapema wa HCC na lengo linalowezekana la molekuli kwa tiba ya epijenetiki.28 Katika utafiti mmoja, hypermethylation ya seramu ya RASSF1A ilipatikana katika 73.3% ya wagonjwa wenye HCC.29 Kipengele cha 1 cha nukleotidi kilichoingiliwa kwa muda mrefu (LINE-1) ni mpatanishi mwingine wa urejeshaji wa hali ya juu sana.Hypomethylation ya LINE-1 ilipatikana katika DNA ya 66.7% ya sampuli za seramu ya HCC na ilihusishwa na kujirudia mapema na maisha duni baada ya urekebishaji mkali.29 Hypermethylation ni mchakato wa kawaida wa kijeni ambao una jukumu la kipekee katika ukuzaji wa cirrhosis ya ini na HCC.30 Kinyume chake, hydroxymethylation ni mchakato wa demethylation ambayo hushawishi uanzishaji wa jeni na kujieleza, na ugunduzi wa bidhaa ya 5-hydroxymethylcytosine (5-hmC) katika mchakato huu inaweza kutumika kutambua tumor.Methylation na hydroxymethylation ya cDNA huhusishwa na tumorigenesis na inaweza kuchangia uchunguzi wa mapema wa HCC.Katika utafiti wa watu 2554, 5-hmCs 31 za genome kote zilipatikana katika sampuli za cfDNA, na jeni 32 zilitambuliwa kwa kulinganisha mlolongo wa 5-hmC kwa wagonjwa wa HCC na vikundi vya hatari kama vile wale walio na magonjwa sugu.Mifano ya uchunguzi wa magonjwa ya ini.na ugonjwa wa cirrhosis.Mtindo huu ulikuwa bora kuliko AFP katika kutofautisha HCC kutoka kwa tishu zisizo za tumor.
Mabadiliko katika maeneo ya usimbaji yanaweza kusababisha makosa ya unukuzi, ambayo yanaweza kusababisha mabadiliko katika mlolongo wa protini na hatimaye saratani.Lahaja za nyukleotidi moja ni viashirio muhimu vya jeni kwa uchunguzi wa mapema wa uvimbe kutokana na utegemezi wa juu wa tishu na umaalum wa juu wa uvimbe na tishu.Tafiti nyingi zinazohusiana na HCC kwa kutumia mpangilio wa kizazi kijacho (NGS) kwa exome na mpangilio mzima wa genome wa saratani zimebainisha jeni za kawaida za seli zilizobadilishwa kama vile TP53 na CTNNB1, pamoja na kadhaa ikijumuisha ARID1A, MLL, IRF2.Jeni mpya, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 na JAK1 zinaonyesha viwango vya wastani vya mabadiliko. Uchanganuzi wa utendakazi wa jeni zinazobadilika unapendekeza kuwa mabadiliko katika urekebishaji wa kromatini, upitishaji wa mawimbi ya Wnt/β-catenin na JAK/STAT, njia ya mzunguko wa seli ya P53, virekebishaji epijenetiki, njia za mkazo wa oksidi, njia ya PI3K/AKT/MTOR na RAS/RAF/ MAPK kinase pathway ina majukumu muhimu katika HCC onkogenesis.32,33 Katika utafiti ambao mabadiliko yanayohusiana na uvimbe yaligunduliwa, Huang et al aligundua kwamba mzunguko wa mabadiliko yanayohusiana na uvimbe unaotegemea ctDNA ulikuwa 19.5%, na umaalum ulikuwa 90%. .34 Kwa kuongeza, wagonjwa ambao walipata uvamizi wa mishipa walikuwa na uwezekano mkubwa wa kuwa na mabadiliko ya ctDNA (P=0.041) na kuishi kwa muda mfupi bila kurudia tena (P<0.001). Uchanganuzi wa utendakazi wa jeni zinazobadilika unapendekeza kuwa mabadiliko katika urekebishaji wa kromatini, upitishaji wa mawimbi ya Wnt/β-catenin na JAK/STAT, njia ya mzunguko wa seli ya P53, virekebishaji epijenetiki, njia za mkazo wa oksidi, njia ya PI3K/AKT/MTOR na RAS/RAF/ MAPK kinase pathway ina majukumu muhimu katika HCC onkogenesis.32,33 Katika utafiti ambao mabadiliko yanayohusiana na uvimbe yaligunduliwa, Huang et al aligundua kwamba mzunguko wa mabadiliko yanayohusiana na uvimbe unaotegemea ctDNA ulikuwa 19.5%, na umaalum ulikuwa 90%. .34 Kwa kuongeza, wagonjwa ambao walipata uvamizi wa mishipa walikuwa na uwezekano mkubwa wa kuwa na mabadiliko ya ctDNA (P=0.041) na kuishi kwa muda mfupi bila kurudia tena (P<0.001).Uchanganuzi wa utendakazi wa jeni zinazobadilika unapendekeza kuwa mabadiliko katika urekebishaji wa kromatini, uwekaji saini wa Wnt/β-catenin na JAK/STAT, njia ya mzunguko wa seli ya P53, virekebishaji epijenetiki, njia za mkazo wa oksidi, njia ya PI3K/AKT/MTOR, na RAS/RAF/ MAPK kinase hucheza. jukumu muhimu katika tumorigenesis ya HCC.32,33 Katika utafiti uliopata mabadiliko yanayohusiana na tumor, Huang et al.iligundua kuwa mzunguko wa mabadiliko yanayohusiana na uvimbe unaotegemea ctDNA ulikuwa 19.5% na umaalum ulikuwa 90%..34 Кроме того, у пациентов сосудистой инвазией чаще встречались мутации цДНК (P=0,041) na более короткая безрецивыдиживя , 1 . .34 Kwa kuongeza, wagonjwa walio na uvamizi wa mishipa walikuwa na mabadiliko zaidi ya cDNA (P=0.041) na maisha mafupi ya bure ya ugonjwa (P<0.001).Uchanganuzi wa kiutendaji wa jeni zinazobadilika ulibaini urekebishaji wa chromatin, Wnt/β-catenin na JAK/STAT, njia ya mzunguko wa seli ya P53, virekebishaji epijenetiki, njia ya mkazo wa oksidi, njia ya PI3K/AKT/MTOR, na RAS/RAF/MAPK. kinase pathway ina jukumu muhimu katika onkogenesis ya HCC. 32,33 在 一 项 到 肿瘤 相关 突变 突变 研究 中 中 中 等 等 等 等 等 等 等 发现 发现 发现 发现.突变(P=0.041) na 更短的无复发生存期（P<0.001). 32.33 在 一 项 到 相关 相关 突变 的 研究 研究 研究 等 等 发现 突变 突变 突变 突变 突变.短的无复发生存期（P<0.001)32,33 Katika utafiti uliogundua mabadiliko yanayohusiana na tumor, Huang et al.iligundua kuwa mabadiliko yanayohusiana na tumor yalikuwa 19.5% ya kutegemea cDNA na maalum ya 90% 34. Aidha, wagonjwa ambao walikuwa wamepitia uvamizi wa mishipa walikuwa na uwezekano mkubwa wa kuendeleza cDNA.мутация (P = 0,041) na более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). mabadiliko (P=0.041) na maisha mafupi yasiyo na magonjwa (P<0.001).Jeni nyingine ya kawaida ya kiendeshi cha HCC ni TP53, ambayo ina kasi ya mabadiliko ya zaidi ya 30%.Uchunguzi umeonyesha kuwa mzunguko wa mabadiliko ya TP53 katika ctDNA katika damu na mkojo ni kati ya 5% hadi 60%.35 Utafiti wa Johan ulionyesha kuwa wigo wa mabadiliko ya ctDNA katika HCC ya marehemu ina kiwango cha mabadiliko sawa na HCC ya mapema, ikijumuisha kikuzaji cha TERT (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), mabadiliko katika AXIN1 ., ARID2, KMT2D na TSC2 (6% kila moja).36 Onkogene ya β-catenin (CTNNB1) ina jukumu muhimu katika njia ya kuashiria Wnt.Kishirikishi cha unukuu CTNNB1 kinaweza kukuza usemi wa jeni, jambo ambalo linaweza kusababisha kuenea kwa seli, kuzuiwa kwa apoptosis na angiojenesisi.CTNNB1 pia inaweza kuingiliana na TERT ili kushawishi mabadiliko ya hepatocyte.33 Promota wa TERT mara nyingi hubadilishwa katika baadhi ya uvimbe mnene.Mabadiliko katika TERT, mojawapo ya mabadiliko ya mapema zaidi ya kijeni katika mabadiliko mabaya ya HCC, yanaweza kusababisha uanzishaji upya wa telomerase katika hepatocyte ya cirrhotic na inaweza kukuza kuenea na kuzuia kuzeeka.Mabadiliko katika promota wa 33-37 TERT yameripotiwa kutokea katika 59-90% ya wagonjwa walio na vinundu vya ini na HCC ya mapema na yanahusishwa na kuishi.38
Mabadiliko ya nambari ya nakala (CNA) ni aina ndogo ya mabadiliko ya somatic.Utafiti umeonyesha kuwa mzigo mkubwa na wa kuzingatia wa CNA ni saini ya jeni yenye uwezo wa kutabiri kupenya kwa kinga ya tumor na kutengwa katika aina fulani za saratani.39 Uingizaji wa ishara hai, shughuli ya juu ya cytolytic, uvimbe mkali na alama za kijeni zinazohusiana na uwasilishaji wa antijeni katika HCC.Uchambuzi wa safu ya data ya upolimishaji moja ya nyukleotidi katika masomo 477 ulifunua mzigo mdogo kwenye mfumo mkuu wa neva.Kinyume chake, uvimbe usio imara wa kromosomu na mzigo mkubwa wa CNA ulionyesha dalili za kukataliwa kwa kinga na zilihusishwa na kuenea, kutengeneza DNA, na kutofanya kazi kwa TP53.Xu na wenzake.ilionyesha kuwa kikundi cha HCC kilikuwa na alama za juu za CNA kuliko kikundi cha magonjwa sugu ya ini.40 Kwa kutumia mfuatano wa jenomu nzima ya seli moja, CNAs zilionekana kuonekana mapema katika hepatocarcinogenesis na kubaki thabiti wakati wa ukuaji wa uvimbe.41 Chung na wengine.iligundua kuwa viwango vya cfDNA viliinuliwa kwa kiasi kikubwa kwa wagonjwa wa HCC na kwamba CNA za genome kote katika cfDNA zilikuwa kiashirio muhimu huru cha ubashiri kwa wagonjwa wa HCC waliotibiwa na sorafenib.42 Wagonjwa walio na mzigo mkubwa wa CNA walikuwa na uwezekano mkubwa wa kuwa na maendeleo ya ugonjwa na kifo kuliko wale walio na mzigo mdogo wa CNA.Ollerich na wengine.iligundua kuwa faharisi ya nambari ya nakala ya kutokuwa na utulivu (CNI) inaweza kutumika kutathmini CNA katika cfDNA ya wagonjwa wa saratani.Walibaini kuwa wagonjwa walio na saratani ya hali ya juu walikuwa na alama za juu zaidi za CNI kuliko kikundi cha kudhibiti, ambacho hutathmini mwitikio wa mgonjwa kwa chemotherapy ya kimfumo na tiba ya kinga.43 Matokeo haya yanapendekeza kwamba CNAs zinazopatikana katika vielelezo vya biopsy kioevu zinaweza kutumika kama viashiria vya ubashiri kwa wagonjwa walio na saratani ya hali ya juu.HCC juu ya msingi wa tiba ya kimfumo.
Hivi sasa, mbinu zinazotumiwa kugundua ctDNA zinaweza kugawanywa katika mbinu zinazolengwa na zisizolengwa.Kwa ufupi, mbinu zinazolengwa kama vile mmenyuko wa mnyororo wa polimerasi dijitali (dPCR), PCR ya kidijitali ya BEAMing, Mfumo wa Mutation wa Kinyume cha Kikuzalishi-PCR, Capp-Seq na Tam-Seq ni nyeti sana kwa jeni zilizobainishwa mapema.Mbinu zisizolengwa kama vile mpangilio mzima wa jenomu na NGS hutoa mwonekano wa kina wa mandhari nzima ya jeni.44 Ikilinganishwa na paneli lengwa, mpangilio mzima wa jenomu unaweza kutambua sio tu mabadiliko ya pointi na uwekaji, lakini pia mipangilio upya na tofauti za nambari za nakala.ubashiri, na CTC na cfDNA ni viashirio vyema vinavyoweza kutumika kwa ufuatiliaji wa nguvu wa HCC.45 Kwa kuongeza, uchanganuzi wa cfDNA unaweza kuwa muhimu zaidi katika kugundua HCC.Yan na wengine.ilionyesha kuwa cfDNA katika plasma ya wagonjwa wenye HCC ilikuwa kubwa zaidi kuliko kwa wagonjwa walio na fibrosis ya ini na udhibiti wa afya.Ikilinganishwa na AFP, ctDNA inatarajiwa kuwa alama bora ya uchunguzi kwa HCC ya mapema.46 Katika utafiti unaotarajiwa wa biopsies 47 za kioevu ambazo zilijaribu cfDNA na protini katika idadi ya watu, zilionyeshwa kuwa na ufanisi katika kutofautisha wagonjwa wenye HCC na wagonjwa wasio na HCC.Katika ufuatiliaji wa wagonjwa 331 wa ultrasound wa kawaida na wasio na AFP, unyeti na umaalumu wa cfDNA kwa ajili ya kuchunguza HCC ulikuwa 100% na 94%, kwa mtiririko huo, hivyo cDNA inaweza kuchunguza HCC katika watu binafsi wasio na dalili za HBsAg.Katika utafiti wa Yeo48, masafa ya juu (92.5%) ya hypermethylation ya promota wa RASSF1A ilipatikana kwa wagonjwa walio na HCC.Kwa kuongeza, Xu et al.iliunda modeli ya uchunguzi kutabiri HCC kwa kutumia jopo la alama maalum za methylation zenye umaalum na unyeti wa 90.5% na 83.3%, mtawalia.Jopo huruhusu wagonjwa walio na HCC kutofautishwa na wagonjwa walio na magonjwa mengine ya ini, ambayo ni bora kuliko AFP.Pia waligundua kuwa udhibiti wa kawaida ambao umethibitishwa kuwa na VVU unaweza kuwa na sababu za hatari kwa HCC, kama vile maambukizi ya HBV au historia ya matumizi ya pombe.25 Tunakisia kwamba sababu za hatari kubwa kwa HCC zinaweza kukuza hypermethylation ya cfDNA, ambayo inachangia maendeleo ya HCC, na hivyo cfDNA inaweza kuwa na jukumu muhimu katika uchunguzi wa makundi yaliyo katika hatari kubwa.Cai na wengine.fanya muhtasari wa anuwai kamili ya mabadiliko ya ctDNA na kutoa mkakati thabiti wa kutathmini mzigo wa tumor kwa wagonjwa.49 Mkakati huu unaweza kutambua tumorigenesis wastani wa miezi 4.6 kabla ya mabadiliko ya picha na umeonyesha utendaji wa juu wa uchunguzi ikilinganishwa na alama za biomarker za serum AFP, AFP-L3, na PIVKA-II.Thamani ya uchunguzi wa upimaji wa cDNA imeonyeshwa wakati tathmini ya picha haipatikani, kwa hivyo upimaji wa cDNA ni wa thamani katika utambuzi wa HCC ya mapema katika vikundi vilivyo katika hatari kubwa.Hivi majuzi, wanasayansi walitumia teknolojia ya NGS kuchanganua viashiria vya utofauti wa maumbile ya aina mbalimbali (ikiwa ni pamoja na 5-hydroxymethylcytosine, 5′-motif, mgawanyiko, nucleosome trace, HIFI) katika sampuli 3204 za kimatibabu na cfDNA.Miundo 50 iliyoidhinishwa upya ya HIFI yenye seti tatu za treni huru, za majaribio na majaribio zilionyesha ubaguzi thabiti na unaotegemewa kati ya HCC na watu wasio wa HCC wenye unyeti wa 95.79% na 95.42% katika seti za majaribio na majaribio mahususi ya HCC, mtawalia.Jinsia hizo zilikuwa 95.00% na 97.83%, mtawalia.Thamani ya uchunguzi wa njia ya HIFI ni ya juu zaidi kuliko ile ya AFP katika kutofautisha HCC kutoka kwa cirrhosis.Kwa kuongeza, ctDNA pia hutumiwa katika matibabu ya upasuaji.Atsushi et al.iliamua viwango vya serum ya ctDNA kabla ya upasuaji kwa wagonjwa walio na HCC na kugundua kwamba kiwango cha kurudia tena na kiwango cha metastasis ya ziada ya hepatic katika kundi chanya ya cDNA ilikuwa kubwa zaidi kuliko katika kundi hasi la cDNA, na viwango vya cDNA vilihusiana sana.na maendeleo ya tumor.51 Kwa kuwa ni alama ya kibayolojia nyeti sana, ctDNA inaweza kutabiri uwezo wa HCC kuvamia vyombo.Wang na wengine.ilifanya mfuatano mzima wa jenomu ya wagonjwa 46 walio na HCC, na uchanganuzi wa aina mbalimbali ulionyesha kuwa thamani ya kizingiti ya mzunguko wa aleli ya lahaja ya cDNA kwa uvamizi kwenye mishipa midogo ni 0.83%, unyeti 89.7% na umaalum 80.0%.sababu huru ya hatari ya uvamizi wa mishipa midogo katika HCC inayoweza kutolewa tena, na kupendekeza kuwa cDNA inaweza kusaidia kuongoza matibabu bora.Kwa kumalizia, ctDNA inahusishwa kikamilifu katika kutokea na ukuzaji wa HCC na inaweza kutumika kwa uchunguzi wa mapema, tathmini ya upasuaji, na ufuatiliaji wa magonjwa.
CTC ni seli mbaya zinazotokana na uvimbe wa msingi au metastasi ambazo huingia kwenye mkondo wa damu.Seli za tumor hutoa metalloproteinase ya matrix (MMPs), ambayo huvunja utando wa basement, kuruhusu seli za tumor kuingia moja kwa moja kwenye damu na mishipa ya lymph.Hata hivyo, CTC nyingi huondolewa haraka na anoikis, mashambulizi ya kinga, au mkazo wa kukata nywele.53 Mpito wa epithelial-mesenchymal (EMT) huruhusu CTC kutengwa kwa urahisi kutoka kwa tishu msingi za uvimbe, kuvamia kapilari, na kupata maisha yaliyoboreshwa kwa kiasi kikubwa, metastasi, uvamizi, na ukinzani wa dawa.Uchunguzi umeonyesha kuwa kuna utofauti mkubwa kati ya seli mbalimbali za uvimbe katika uvimbe wa msingi wa metastatic.Kwa hivyo, uchambuzi wa CTC unaweza kusababisha uelewa wa kina wa heterogeneity ya seli za tumor.54
Alama mahususi za CTC zinazohusishwa na HCC ni pamoja na glypican-3 (GPC3), kipokezi cha asialoglycoprotein (ASGPR), molekuli ya adhesi ya seli ya epithelial (EpCAM) na vialama vinavyohusishwa na seli shina kama vile CD44, CD90, 55 na molekuli 1 ya kuunganishwa kwa seli (ICAM1).) .56 Alama ya GPC3 ni protini iliyotiwa nanga na utando wa seli ambayo hutumiwa kimatibabu kwa uchanganuzi wa kiafya na uainishaji wa HCC.57 Usemi wa GPC3 ni wa kawaida zaidi katika seli za uvimbe za HCC zenye utofautishaji wa kati na wa chini na hukuza uhamaji wa nje ya ini;kwa kuongeza, uwepo wa GPC3+ CTC unaonyesha HCC ya metastatic.58 ASGPR ni protini ya transmembrane inayoonyeshwa tu juu ya uso wa hepatocytes na inaonyeshwa sana katika HCC iliyotofautishwa vizuri.EpCAM ni mojawapo ya protini zinazohusishwa na utando zinazotumiwa sana kunasa CTC.EpCAM imetambuliwa kama alama ya uso ya seli za HCC zilizo na sifa za seli shina,59 ambayo inahusiana na vipengele mbalimbali vya kiafya vya HCC, kama vile uvamizi wa mishipa, viwango vya AFP vilivyotathminiwa, na hatua ya juu ya saratani ya ini katika Hospitali ya Barcelona (BCLC).Phenotype ya 60 CTC EMT ina metastatic sana.54 Michakato ya EMT katika CTC inakuza metastasi ya HCC.Usemi wa vialama vya EMT kama vile vimentin, twist, E-box zinki kufunga kidole (ZEB) 1, ZEB2, konokono, koa, na E-cadherin vimechunguzwa katika CTC zinazotokana na ini kutoka kwa wagonjwa wa HCC.58 Mfumo wa CanPatrol™ uliotengenezwa na Cheng [61] uliainisha CTC katika vikundi vidogo vitatu vya phenotypic kulingana na vialamisho vilivyoonyeshwa zaidi: epithelial phenotype (EpCAM, CK8/18/19), phenotype ya mesenchymal (vimentin, iliyoviringwa), na phenotypes mchanganyiko.Katika wagonjwa 176, jumla ya CTC ilikuwa bora kuliko AFP katika kutofautisha HCC na ugonjwa wa ini usio na ugonjwa.Thamani za AUC kwa jumla ya CTC, AFP, na jumla ya jumla ya CTC na AFP zilikuwa 0.774 (95% CI, 0.704-0.834), 0.669 (95% CI, 0.587-0.750), na 0.821 (95% CI, 0.886-0.786) )), kwa mtiririko huo.Uainishaji wa CTC kulingana na EMT unaweza kutabiri utambuzi wa HCC, kujirudia mapema, metastasis, na muda mfupi wa jumla.
Hivi sasa, mbinu za kugundua CSC zinajumuisha mbinu za kimwili na mbinu za kibayolojia.Mbinu za kimaumbile, mara nyingi hujulikana kama uboreshaji kulingana na sifa za kibayolojia, hutegemea zaidi sifa za kimwili za CSC, kama vile ukubwa, msongamano, chaji, uhamaji na ulemavu.Kulingana na sifa za kimaumbile, kuna mbinu mbalimbali kama vile mifumo inayotegemea uchujaji, dielectrophoresis, n.k. Njia hii ya mwisho, pia inajulikana kama uboreshaji wa msingi wa kingamwili, inategemea hasa ufungaji wa antijeni-kingamwili kwa vile mbinu hiyo hutumia kingamwili dhidi ya vialama mahususi vya uvimbe. kama vile EpCAM, ASGPR, kipokezi cha sababu ya ukuaji wa ngozi ya ngozi ya binadamu 2 (HER2), antijeni mahususi ya kibofu (PSA), pancytokeratin ya binadamu (P-CK) na carbamoyl fosfati synthase 1 (CPS1).[62] Aina nyingine, inayoitwa mbinu ya kutokuza utajitaji, hutumia saitoometri ya mtiririko ili kutofautisha CTC na lukosaiti kulingana na uwiano wa juu wa nyuklia-kwa-cytoplasmic na ukubwa.Kwa sasa, jaribio la pekee lililoidhinishwa na FDA la ugunduzi wa CTC ni mfumo wa Cell-Search™, unaotumia alama ya uso wa seli ya EpCAM. Hata hivyo, ugunduzi wa CTC unaotegemea alama kwa pamoja unaweza kuongeza kiwango cha chanya.54 Mchanganyiko wa kingamwili dhidi ya ASGPR na CPS1 ulipata kiwango cha ugunduzi wa CTC cha 91% kwa wagonjwa wa HCC.63 Zhang et al alitumia CTC-Chip yenye kingamwili dhidi ya ASGPR, P. -CK na CPS1, na kutofautisha wagonjwa wa HCC kutoka kwa wale walio na ugonjwa mbaya wa ini au saratani isiyo ya HCC kwa kiwango cha 100%.64 Utafiti wa Wang uligundua EpCAM+ CTCs katika 60% ya wagonjwa 42 wa HCC na kupata uwiano mkubwa kati ya chanya zote mbili. kiwango na idadi ya CTC zilizo na hatua ya TNM.65 Guo et al aligundua kuwa alama ya PCR inayotokana na CTC iliongezeka kwa wagonjwa 125/171 (73%) ambao kiwango chao cha AFP kilikuwa <20 ng/mL na unyeti wa 72.5% na a. maalum ya 95.0%, ikilinganishwa na 57.0% na 90.0% kwa AFP kwa kukata 20 ng/mL.66 Mchanganyiko wa AFP na CTCs unaweza kuboresha ugunduzi wa HCC.45 Inaaminika kuwa CTCs zina faida zaidi ya AFP katika uchunguzi wa mapema wa vikundi. katika hatari kubwa kwa HCC. Hata hivyo, ugunduzi wa CTC unaotegemea alama kwa pamoja unaweza kuongeza kiwango cha chanya.54 Mchanganyiko wa kingamwili dhidi ya ASGPR na CPS1 ulipata kiwango cha ugunduzi wa CTC cha 91% kwa wagonjwa wa HCC.63 Zhang et al alitumia CTC-Chip yenye kingamwili dhidi ya ASGPR, P. -CK na CPS1, na kutofautisha wagonjwa wa HCC kutoka kwa wale walio na ugonjwa mbaya wa ini au saratani isiyo ya HCC kwa kiwango cha 100%.64 Utafiti wa Wang uligundua EpCAM+ CTCs katika 60% ya wagonjwa 42 wa HCC na kupata uwiano mkubwa kati ya chanya zote mbili. kiwango na idadi ya CTC zilizo na hatua ya TNM.65 Guo et al aligundua kuwa alama ya PCR inayotokana na CTC iliongezeka kwa wagonjwa 125/171 (73%) ambao kiwango chao cha AFP kilikuwa <20 ng/mL na unyeti wa 72.5% na a. maalum ya 95.0%, ikilinganishwa na 57.0% na 90.0% kwa AFP kwa kukata 20 ng/mL.66 Mchanganyiko wa AFP na CTCs unaweza kuboresha ugunduzi wa HCC.45 Inaaminika kuwa CTCs zina faida zaidi ya AFP katika uchunguzi wa mapema wa vikundi. katika hatari kubwa ya HCC.Hata hivyo, ugunduzi wa pamoja wa CTC kwa msingi wa alama unaweza kuongeza asilimia ya matokeo chanya.54 Mchanganyiko wa kingamwili za ASGPR na CPS1 ulipata kiwango cha ugunduzi wa CTC cha 91% kwa wagonjwa walio na HCC.63 Zhang et al.ilitumia CTC-Chip yenye kingamwili dhidi ya ASGPR, P-CK na CPS1, na pia ilitofautisha wagonjwa wenye HCC kutoka kwa wale walio na ugonjwa wa ini usio na ugonjwa au wasio HCC kwa kiwango cha 100%.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. frequency na idadi ya CTC zenye hatua ya TNM.65 Guo et al aligundua kuwa PCR inayotokana na CTCs iliinuliwa kwa wagonjwa 125/171 (73%) waliokuwa na viwango vya AFP <20 ng/mL na unyeti wa 72.5% na umaalum wa 95.0% ikilinganishwa na 57.0% na 90.0% kwa AFP katika kiwango cha kukatwa cha 20 ng/mL.66 Mchanganyiko wa AFP na CTCs unaweza kuboresha utambuzi wa HCC.45 CTCs huchukuliwa kuwa na faida zaidi ya AFP katika uchunguzi wa mapema. vikundi.na hatari kubwa ya HCC.Hata hivyo, utambuzi wa pamoja wa CTC kwa msingi wa alama unaweza kuongeza asilimia ya matokeo chanya.54 Mchanganyiko wa kingamwili za ASGPR na CPS1 ulipata kiwango cha ugunduzi wa CTC cha 91% kwa wagonjwa walio na HCC.63 Zhang et al.ilitumia chips za CTC zenye kingamwili dhidi ya ASGPR, P-CK na CPS1 na kuwatofautisha wagonjwa wenye HCC kutokana na ugonjwa wa ini usio na ugonjwa na wasio HCC wenye 100%.Utafiti wa 64 Wang ulibainisha 60% ya EpCAM+ CTCs katika wagonjwa 42 wa HCC na ukapata uwiano mkubwa kati ya matukio na idadi ya CTC katika hatua ya TNM. 65 Guo 等人发现，在AFP 水平<20 ng/mL 的125/171 (73%) 名患者中，CTC 衍生的PCR 评分升高，敂感性，敂感性，敂感性，敂感性，敂感性，敂感性，敂感性，敂感性，A73感，敂感性，者感 5%.值为20 ng/mL 时的特异性為57.0% 和90.0%. 65 Guo 等 人 发现 在 在 在 水平 <20 ng/ml 的 125/171 (73%) 名 患者 ， ， ctc 衍生 pcr 评分 ， 敏感性 为 为 72.5%， 为 95.0%， AFP 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止65 Guo na wenzake.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг/мл. iligundua kuwa katika wagonjwa 125/171 (73%) walio na viwango vya AFP chini ya 20 ng/mL, viwango vya PCR vinavyotokana na CTC viliinuliwa kwa unyeti wa 72.5% na maalum ya 95.0%, wakati AFP ilikuwa katika hali maalum. ilikuwa 20 ng/mL.ml ilikuwa 57.0% na 90.0%.66 Mchanganyiko wa ORP na CTC huboresha utambuzi wa HCC.CTC 45 zinadhaniwa kuwa bora kuliko AFP katika uchunguzi wa mapema wa idadi ya watu walio katika hatari kubwa ya HCC.Kwa hivyo, kwa vikundi vya HCC vilivyo na CTC-chanya na hatari kubwa, upimaji wa CTC unapaswa kuunganishwa mara kwa mara na utambuzi wa ultrasound na AFP.Hata hivyo, CTC huchukuliwa kuwa vitabiri muhimu vya metastasis ya uvimbe na kujirudia, na ugunduzi wa CTC haupendekezwi kama zana ya uchunguzi.62 Kwa hivyo, CTC inaweza kutumika kama kiashirio bora cha ubashiri kuliko vialamisho vingine vinavyotumika sasa. Zhou et al aligundua kuwa wagonjwa walio na idadi kubwa ya EpCAM+ CTCs na seli za T za udhibiti walionyesha hatari kubwa ya kuendeleza HCC kujirudia, kuliko wale walio na idadi ndogo ya CTCs, na uwiano wa kurudia wa 66.7% dhidi ya 10.3% (P <0.001).67 Utafiti kama huo uliripotiwa na Zhong et al.68 Aidha, Qi iligundua kuwa wagonjwa 101 kati ya 112 (90.81%) walio na HCC, ikiwa ni pamoja na wale walio na ugonjwa wa mapema, walikuwa na CTCs na kwamba vinundu vidogo sana vya HCC viligunduliwa baada ya 3. hadi miezi 5 ya ufuatiliaji. Zhou et al aligundua kuwa wagonjwa walio na idadi kubwa ya EpCAM+ CTCs na seli za T za udhibiti walionyesha hatari kubwa ya kupata HCC kujirudia kuliko wale walio na idadi ndogo ya CTC, na uwiano wa kujirudia wa 66.7% dhidi ya 10.3% (P <0.001).67 A Utafiti kama huo uliripotiwa na Zhong et al.68 Aidha, Qi iligundua kuwa wagonjwa 101 kati ya 112 (90.81%) walio na HCC, ikiwa ni pamoja na wale walio na ugonjwa wa mapema, walikuwa na CTCs na kwamba vinundu vidogo sana vya HCC viligunduliwa baada ya 3 hadi Miezi 5 ya ufuatiliaji. Чжоу na др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou et al aligundua kuwa wagonjwa walio na EpCAM+ CTC zilizoinuliwa na seli za T za udhibiti walikuwa na hatari kubwa ya kujirudia kwa HCC kuliko wale walio na CTC za chini, na kiwango cha kujirudia cha 66.7% dhidi ya 10.3% (P<0.001 )67.Utafiti kama huo ulifanywa na Zhong et al.68. Aidha, Qi iligundua kuwa wagonjwa 101 kati ya 112 (90.81%) wenye HCC, ikiwa ni pamoja na wale waliokuwa na magonjwa ya awali, walikuwa na CTC, na kwamba vinundu vidogo sana vya HCC viligunduliwa baada ya miezi 3 hadi 5 ya ufuatiliaji. Zhou 等 人 发现 ， 与 CTC 数量 较 少 患者 相比 相比 相比 相比 相比 发生 患者 患者 患者 和 Zhou 等 人 发现 与 与 CTC 数量 少 的 相比 相比 相比 相比 相比 相比 的 的 少p <0.001)........ Чжоу na др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhou na wengine.iligundua kuwa wagonjwa walio na EpCAM + CTC zilizoinuliwa na seli za T za udhibiti walikuwa na hatari kubwa ya kurudi tena kwa HCC ikilinganishwa na wagonjwa wenye CTC chache, na viwango vya kurudia vya 66.7% na 10.3%, kwa mtiririko huo (P <0.001).Utafiti kama huo uliripotiwa na Zhong et al.68 Aidha, Qi iligundua kuwa wagonjwa 101 kati ya 112 wa HCC (90.81%), ikiwa ni pamoja na wagonjwa wa mapema, walikuwa na matokeo mazuri ya CTC na walipata vinundu vidogo sana vya HCC baada ya ziara 3.Uchunguzi hadi miezi 5.Pia walipata CTC kwa wagonjwa 12 walio na maambukizi ya muda mrefu ya HBV na walipata uvimbe mdogo wa HCC ndani ya miezi 5 kwa wagonjwa 2 waliokuwa na CTC.69 Kwa hivyo, CTCs zinaweza kutumiwa kutabiri HCC, 70 lakini zinaweza kutumiwa kimazoea zaidi kama viashirio vya kubashiri.
Kama cfDNA, cfRNA inatolewa kwenye mkondo wa damu kupitia mifumo mbalimbali.Molekuli hizi katika damu ya pembeni huwakilisha tishu za saratani ya asili.Ikilinganishwa na vialama vinavyotambuliwa na mbinu zisizo vamizi, cfRNAs zinadhibitiwa kwa nguvu zaidi, maalum kwa tishu, na nyingi katika mazingira ya nje ya seli.Umuhimu na thamani ya uchunguzi wa 71 miRNAs (miRNAs) katika HCC imeripotiwa katika tafiti nyingi.miRNA ni RNA za asili zisizo na misimbo (ncRNAs) ambazo hudhibiti shughuli mbalimbali za kibiolojia za molekuli kwa kuzuia tafsiri ya RNA za wajumbe lengwa (mRNAs).miRNA ziko katika miili ya apoptotiki iliyofunikwa katika exosomes, lakini pia zinaweza kushikamana kwa uthabiti kwa protini za seramu na lipids katika damu ya pembeni na zinaweza kutumika kutathmini HCC.microRNAs zinahusika katika kuzaliwa upya kwa ini, kimetaboliki ya lipid, apoptosis, kuvimba, na maendeleo ya HCC.72 MiRNA ya Oncogenic kama vile miR-21, miR-155 na miR-221 inajulikana sana katika HCC.Hasa, miR-21 ina jukumu muhimu katika usanisi wa collagen katika tumbo la nje ya seli na adilifu na kukuza hepatocarcinogenesis kwa kuamsha seli shina za damu.72,73 MiRNA ya kuzuia uvimbe katika HCC ni pamoja na miRNA-122, miRNA-29, familia ya Let-7, na familia ya miRNA-15.Familia ya Let-7 ina miRNA nyingi za kukandamiza uvimbe ambazo zinalenga familia ya RAS.Familia ya miR-15 inajumuisha miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195, na miR-497, ambayo ina mfuatano wa ziada wa mRNA fulani.Kwa kuongeza, RNA ndefu zisizo na msimbo (lncRNAs) na RNA za duara (cirRNAs) pia ni muhimu kwa uchunguzi wa mapema wa HCC.lncRNAs kuwakilisha darasa pana zaidi la ncRNAs, ikiwa ni pamoja na mRNA-kama ncRNAs, na kushiriki katika pathogenesis ya magonjwa mengi ya binadamu.LncRNAs huchukua jukumu la udhibiti katika mazingira madogo ya ini na ugonjwa sugu wa ini.74 CircRNAs pia ni darasa la ncRNA zilizo na kazi nyingi katika udhibiti wa usemi wa jeni.Hivi majuzi, circRNAs zimezingatiwa kama zana za uchunguzi wa HCC.
RNA isiyolipishwa inayozunguka ina uthabiti wa ajabu, ikiwa ni pamoja na upinzani dhidi ya halijoto, pH, na RNase, ambayo hufanya utengaji wa fnRNA kutoka kwa damu ya pembeni kuwa wa kuchosha kwa kutumia mbinu za kawaida za utakaso wa RNA.Njia zinazotumiwa sana ni pamoja na NGS, microarray na RT-qPCR.NGS huruhusu microRNA kupimwa kote katika jenomu.Hata hivyo, njia hii ni ghali na uchambuzi si sanifu.Kinyume chake, RT-qPCR ni ya bei nafuu, huongeza kasi ya asidi nucleiki, na inatoa faida nyingi kama vile usikivu wa juu, usahihi wa juu, safu pana zaidi, na kuhitaji sampuli chache.Mipangilio midogo ni njia nyingine inayotumiwa kutambua miRNA kwa msingi wa uchanganyaji nyeti na mahususi wa miRNA lengwa na uchunguzi wa DNA wa ziada, 75 lakini uchanganuzi wa data ya safu ndogo unatumia wakati mwingi.
MiR-122 na Let-7 zinazozunguka zimeripotiwa kuwa na manufaa katika kutambua HCC ya hatua ya awali katika vikundi vilivyo katika hatari kubwa, viashirio kwa wagonjwa walio na vinundu vya premalignant vinavyohusiana na HBV na HCC ya hatua ya mapema.76 Cai na wengine.iligundua kuwa washiriki wa familia ya Let-7 (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126, na miR-199a/b) wako katika hatari ya kupata magonjwa sugu. HCC kwa wagonjwa wenye hepatitis.Familia ya Let-7 inaweza kutumika kama alama mbadala ya kutabiri maendeleo ya HCC katika makundi hatarishi yanayohusiana na ugonjwa sugu wa hepatitis C. 77 miR-122 ina usahihi wa juu wa uchunguzi katika kugundua HCC mapema kwa wagonjwa walio na cirrhosis ya ini.78 Serum inayozunguka MiR-107 pia imetathminiwa katika hatua za mwanzo za HCC, 79 na imeonyesha uwezo mzuri katika idadi ya watu walio katika hatari kubwa.Zhou et al aliripoti kuwa jopo la miRNAs (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a na miR-801) inaweza kutofautisha HCC kutoka kwa hepatitis B ya muda mrefu (CHB) na cirrhosis. unyeti ulikuwa 79.1% na 75%, na maalum 76.4% na 91.1%, kwa mtiririko huo.80 Katika HCC inayohusiana na HBV, tuligundua kuwa viwango vya miR150 vilipunguzwa kwa kiasi kikubwa ikilinganishwa na vile vya wagonjwa wa muda mrefu wa HBV bila HCC (unyeti 79.1%, umaalum 76.5%).-224 iliinuliwa katika HCC ikilinganishwa na udhibiti wa afya, na uchambuzi wa kikundi kidogo ulionyesha viwango vya juu kwa wagonjwa wenye HCC inayohusishwa na HBV.hepatitis B-kuhusishwa cirrhosis na HCC wagonjwa kutambuliwa classifier siRNA zenye siRNAs saba tofauti walionyesha ambayo inaweza kuchunguza HCC katika udhibiti tofauti;Masafa ya AUC katika uchunguzi wa mapema ni bora kuliko watu waliojitolea wa AFP.Waligundua kuwa miRNA nne (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p, na miR-365a-3p) zinaweza kutofautisha wagonjwa wenye HCC na wagonjwa wasio na HCC.MiRNA tano zinazojieleza kupita kiasi (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p, na miR-148a-3p) huchukuliwa kuwa maambukizo ya HBV katika HCC, cirrhosis, na alama za bioanuwai za CHB, haswa. miR-34a-5p inaweza kuwa viashirio kwa ajili ya ugonjwa wa cirrhosis ya ini,85 na inaweza kuwa viashirio vinavyowezekana vya uchunguzi wa mapema wa HCC katika idadi ya watu walio katika hatari kubwa.LncRNA iliyosomwa zaidi katika HCC imeamilishwa sana katika saratani ya ini (HULC).Uchunguzi mwingine umeonyesha kuwa HULC inayozunguka kwa wagonjwa wa HCC inaweza kutumika kama kiashirio cha utambuzi kwa sababu lncRNA hii imedhibitiwa sana kwa wagonjwa wa HCC ikilinganishwa na watu wenye afya.71,86 Miongoni mwa lnRNA nyingine, LINC00152 inachukuliwa kuwa lncRNA bora zaidi ya uchunguzi kutokana na AUC yake ya juu, unyeti na maalum.86 Katika utafiti mmoja, usemi wa damu wa pembeni wa LINC00152 uliongezeka polepole kutoka kwa udhibiti wa kawaida wa kiafya hadi kwa wagonjwa wenye CHB na cirrhosis, na hatimaye ulikuwa wa juu zaidi katika HCC.Uchunguzi wa usemi wa circSMARCA5 katika plazima ya wagonjwa walio na HCC umeonyesha kupungua kwa kasi kwa kujieleza katika HCC kuanzia hepatitis hadi cirrhosis na vidonda vya precancerous.87 Uchambuzi wa mikunjo ya ROC ulithibitisha uwezo wa circRNA hizi katika kutofautisha wagonjwa wenye homa ya ini au cirrhosis ya ini na wale walio na HCC, hasa wale walio na viwango vya AFP chini ya 200 ng/mL.Kwa kuongeza, Zhu alichambua RNA za mzunguko 13,617 katika sampuli za plasma kutoka kwa wagonjwa wa HBV inayohusishwa na HBV na kuthibitisha kuwa RNA 6 za mzunguko zilionyeshwa tofauti katika cirrhosis ya HCC na HBV inayohusishwa, na kupendekeza kuwa cRNA inaweza kuwa na manufaa.alama za uchunguzi wa mapema wa vikundi vilivyo katika hatari kubwa kama vile vinavyohusishwa na ugonjwa wa ini, wagonjwa wa sclerosis.88
Exosomes ni vilengelenge vya membrane 40-160 nm kwa kipenyo;vilengelenge vingi vya ndani ya seli huungana na utando wa seli na kutolewa kwenye tumbo la nje ya seli.Zina viambajengo vingi amilifu, ikijumuisha lipids, protini, RNA na DNA, na huchukua jukumu muhimu katika mawasiliano kati ya seli, seli za HCC na zisizo za HCC.89,90 Exosomes hudhibiti kuendelea kwa HCC kwa kuwezesha hepatocyte fibroblasts na seli za nyota, seli za kinga, hepatocytes za kawaida, na seli za HCC.91 Katika mazingira madogo ya tumor, seli za tumor hutoa idadi kubwa ya exosomes ambayo hutolewa kutoka kwa seli za saratani hadi seli ambazo hazijakomaa, ambazo zinahusika katika onkogenesis, uharibifu, na ishara za seli.92 Uchunguzi umeonyesha kuwa exosomes inaweza kuhamisha onkojeni kwa seli za kawaida wakati wa michakato ya pathological, ambayo inaweza kuwa moja ya taratibu za uvamizi wa tumor na metastasis.93 Jukumu la exosomes katika maendeleo ya saratani inaweza kuwa ya nguvu na maalum kwa aina ya saratani, 89 Exosomes inaweza kuingizwa ndani na seli za karibu au za mbali ili kudhibiti jeni nyingi zinazolengwa katika seli za mpokeaji ambazo zinaweza kuhusika katika ioni za mawasiliano kati ya seli na mwingiliano wa microenvironment ya seli. kupatanisha ishara za seli na kimetaboliki.94 Tabia na mabadiliko ya nguvu ya molekuli za mizigo ya exosome huonyesha moja kwa moja sifa na mabadiliko ya nguvu ya seli za tumor ya wazazi,95 ambayo pia ni msingi wa matumizi ya exosomes katika uchunguzi na ubashiri wa saratani, na pia kwa kutabiri majibu ya mtu binafsi kwa tiba ya anticancer. ..96
Mbinu za kimaabara za kutenganisha na kuchambua exosomes ni ngumu, hatua nyingi, na zinatumia muda mwingi, ikiwa ni pamoja na ultracentrifugation, filtration, kromatografia ya kutengwa, utakaso wa immunoaffinity, Western blotting, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), PCR, na uchambuzi wa mtiririko.mifumo ya miniaturized na majukwaa ya maabara-on-a-chip kwa kutumia micro/nanoteknolojia yanaendelezwa kwa upana kwa ajili ya utengaji wa haraka, unaofaa katika situ wa exosomes.Uchambuzi wa ufuatiliaji wa nanoparticle (NTA) ni mbinu inayotumika sana kubainisha ukubwa na mkusanyiko wa exosomes, ikijumuisha mbinu kama vile chembechembe za sumaku na polyhydroxyalkanoates.Njia za microfluidic na electrochemical pia zinaweza kutambua kwa haraka exosomes katika mavuno mengi.
Protini za exosomal ni alama muhimu za utambuzi wa HCC.Katika utafiti wa Arbelaiz, kiwango cha 98 RasGAP SH3 kinachofunga protini (G3BP) na kipokezi cha immunoglobulin cha polymeric (PIGR) kiliinuliwa kwa kiasi kikubwa katika exosomes zinazotokana na HCC, na ufanisi wa kuweka pamoja wa protini hizo mbili ulikuwa bora kuliko ule wa AFP.Kuzidisha kwa chuma ni jambo muhimu linalochangia maendeleo ya HCC.Tseng aliripoti kuwa hepcidin inaweza kuchukua jukumu muhimu katika upinzani dhidi ya HCC.99 Exosomes zinazotokana na sera ya wagonjwa wa HCC zilikuwa na nakala ya juu zaidi ya lahaja za hepcidin mRNA kuliko wenzao wenye afya, na kupendekeza kwamba hepcidin inaweza kuwa kiashirio kipya cha uchunguzi wa HCC.Protini ya 14-3-3ζ katika exosomes zinazozalishwa na 100 HCC inaweza kupunguza uanzishaji wa seli T, kuenea, na utofautishaji na inaweza kushawishi mabadiliko ya seli ya T kuwa seli za T za udhibiti, na kusababisha kupungua kwa seli za T.101 Hii inaungwa mkono na tafiti kadhaa zinazochunguza ukwepaji wa uvimbe kutoka kwa uchunguzi wa kinga, 102 ambao unaweza kuchangia uvimbe wa HCC.
Kando na uwepo wa ecRNA katika plazima au seramu, exosomes zilizoboreshwa na RNA zinaweza kutumika kwa uwekaji wa wakati halisi usiovamizi katika uchunguzi wa mapema wa uvimbe na kubainisha mabadiliko ya uvimbe na mwitikio wa tiba.Kiwango cha miRNA-21 ya exosomal katika seramu ya damu katika kundi la HCC ilikuwa mara 2.21 zaidi kuliko katika kundi la CHB, na katika kundi la HCC ilikuwa mara 5.57 zaidi kuliko idadi ya watu wenye afya.Katika utafiti wa Wang, exosomes iliongeza HCC kwa kiasi kikubwa ikilinganishwa na wagonjwa wa cirrhotic na maadili ya AUC ya 0.83 (95% CI 0.74-0.93) na 0.94 (95% CI 0.88-1.00).104 Data iliyopatikana ilifafanua kuhusika kwa molekuli maalum za mizigo ya exosomal katika udhibiti wa onkogenesis na maendeleo ya HCC.105 Usemi wa Seramu ya miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 na miR-26a ni thabiti.na metastasis, na viwango vya miR21 vilikuwa vya juu zaidi kwa wagonjwa wa HCC kuliko katika udhibiti wa afya na pia kwa wagonjwa wa CHB.102 LncRNA ilikuwa na thamani ya uchunguzi katika HCC.Uchunguzi umeonyesha kuwa exosomes inayotokana na sera ya wagonjwa wa HCC ina viwango vya juu zaidi vya LINC00161, LINC000635, na lncRNA iliyoamilishwa kwa kubadilisha sababu ya ukuaji-β kuliko kwa wagonjwa wasio na HCC, na lncRNA hizi zinahusishwa sana na hatua ya TNM na kiasi cha tumor.110 Conigliaro et al.Exosomes za CD90+ zilipatikana kuonyesha viwango vya juu vya lncRNAH19, ambayo iliongeza kwa kiasi kikubwa kutolewa kwa sababu ya ukuaji wa mishipa ya mwisho (VEGF) na utengenezaji wa vipokezi vya VEGF-R1, na hivyo kuchochea angiogenesis.93 CircRNAs ni aina nyingine ya ncRNAs exosomal - iliyoonyeshwa katika viwango vya chini lakini thabiti katika spishi zote, circRNAs pia huonyesha umaalum kwa aina ya seli, aina ya tishu, hatua ya ukuaji na shughuli za udhibiti.111 circRNAs ni viashirio vya uchunguzi wa saratani ya mapema na yenye uvamizi mdogo.112 Majaribio ya kimatibabu ya hivi majuzi yameonyesha kuwa umaalum wa miRNA ya mtu binafsi katika kutabiri HCC si bora.Kwa hivyo, ugunduzi changamano kwa kutumia vipimo vingi (kwa mfano, miR-122 na miR-48a pamoja na AFP) unaweza kuboresha utambuzi wa HCC ya mapema na utofautishaji wa HCC kutoka kwa cirrhosis.100
Wagonjwa walio na CHB na cirrhosis ya ini ndio kundi la hatari kubwa la kupata HCC.Kwa vikundi vilivyo katika hatari kubwa, mara tu majibu endelevu ya virusi yamepatikana, mkakati wa ufuatiliaji wa gharama nafuu kulingana na hatari ya HCC unapaswa kutengenezwa, na uchunguzi wa mapema ndio ufunguo wa kuboresha utambuzi na matibabu ya HCC kwa uwiano wa juu wa ufanisi wa gharama2. ..Mbinu za uchunguzi wa mapema za saratani zina vikwazo vingi: mbinu bora za uchunguzi wa mapema hazijatengenezwa kwa aina nyingi za saratani, na ufuasi kwa kawaida ni mdogo.Ikilinganishwa na mbinu za kitamaduni za uchunguzi wa mapema, teknolojia ya biopsy ya kioevu ina faida dhahiri: urahisi wa sampuli, ugunduzi wa panrac, uzazi mzuri wa sampuli, na mwitikio mzuri kwa heterogeneity ya tumor.Kwa kuzingatia ufanisi wa gharama ya mbinu zinazohusiana na biopsy kioevu, matumizi yao katika uchunguzi wa HCC haijajaribiwa mara kwa mara.Licha ya maendeleo katika ugunduzi sahihi katika kiwango cha molekuli, uchunguzi wa kiowevu ni gharama kubwa kugundua HCC katika wagonjwa lengwa, ikizuia matumizi yake mengi ikilinganishwa na taratibu mahususi za kupiga picha kama vile upigaji picha na upigaji picha wa sumaku.113,114 Hata hivyo, uchunguzi wa awali ulionyesha kuwa biopsy ya kioevu ilionyesha faida kubwa katika suala la miaka ya maisha iliyorekebishwa kwa ubora (QALYs).115 Faida za biopsy ya kioevu katika saratani ya mapema ya tumbo na nasopharynx pia imeonyeshwa.116,117 Mtazamo wa sasa ni kwamba biopsy ya kioevu inaweza kukamilisha alama za seramu na uchunguzi wa radiolojia katika kugundua na kutambua uvimbe.117 118
Kulingana na fasihi ya sasa, teknolojia ya biopsy ya maji imeonyesha unyeti wa juu zaidi na umaalum katika uchunguzi wa mapema wa vikundi vilivyo hatarini kwa saratani ya ini.Bila kujali aina ya biopsy ya majimaji, inaweza kutofautisha HCC na watu walio katika hatari kubwa bila HCC, ikipendekeza umuhimu wa uchunguzi wa mapema kwani tofauti kati ya watu walio katika hatari kubwa na afya nzuri zinaonekana.ctDNA ina nusu ya maisha mafupi na inaweza kutumika kugundua HCC, kwa hivyo mabadiliko yoyote katika cDNA inayotokana na uvimbe yanaweza kutoa ushahidi madhubuti wa wakati halisi wa kuendelea kwa uvimbe, hasa kwa uvimbe mdogo.Kiwango cha juu cha ctDNA kinaonyesha ukuaji na kuenea kwa saratani na ni kiashiria cha mapema cha kuendelea na kurudi tena.Kwa kuongeza, kulingana na matokeo ya ctDNA, wagonjwa wanaweza kupokea matibabu ya kibinafsi na ufuatiliaji.119 Maeneo mahususi ya umethili yanaweza kuwa alama bora kuliko AFP kwa utambuzi wa mapema wa HCC na vinundu vya cirrhotic.Katika visa vinavyoweza kurekebishwa vya HCC, viwango vya juu vya cDNA vinaonyesha uvamizi wa mishipa midogo na kujirudia baada ya upasuaji na metastasis.Mabadiliko katika nambari ya nakala yanahusishwa na maisha ya wagonjwa walio na HCC.Inaweza kudhaniwa kuwa tathmini ya cDNA inaweza kuhusika katika matibabu ya jumla ya HCC, na cDNA inaweza kutumika kama kiashirio bora cha urekebishaji wa matibabu.Alama kulingana na mabadiliko maalum ya kijeni katika ctDNA zimepitishwa na miongozo ya kimatibabu ili kutabiri ufanisi na kufuatilia ukinzani wa dawa.Uchunguzi wa ctDNA unaweza kuwa chombo muhimu zaidi cha biopsy kioevu kwa uchunguzi wa mapema.CTC pia zina jukumu muhimu katika uchunguzi wa mapema wa vikundi vya HCC vilivyo katika hatari kubwa.Alama mbalimbali za CTC zinazohusishwa na HCC ni za umuhimu mahususi katika kuanza, ukuzaji, na kujirudia kwa HCC.Kama vilengelenge vya utando, exosomes huhusika katika mawasiliano baina ya seli, hasa katika seli za HCC.MicroRNA zinazozunguka ni thabiti katika damu na kwa hivyo zinaweza kuwa muhimu zaidi kwa uchunguzi wa mapema wa HCC.Hatua kwa hatua, protini za exosomal na exosomes tajiri ya RNA ziligunduliwa, na ufanisi wao wa kutabiri kwa HCC ulithibitishwa.Jambo la kushangaza ni kwamba etiolojia tofauti za HCC pia zinaweza kuhusishwa na mabadiliko tofauti, kwa hivyo tunaweza kuchagua vialamisho tofauti vya kibayolojia kwa uchunguzi wa mapema kulingana na etiolojia tofauti za HCC.120
Hata hivyo, mbinu za sasa za biopsy ya maji zinatia shaka katika suala la uthabiti na haziwezi kufanya uchunguzi wa mapema au ufuatiliaji wa HCC kwa kujitegemea, lakini bado zinaweza kukamilisha uchunguzi na uchunguzi wa mtu binafsi.121 Kama aina ya biopsy ya kioevu, ugunduzi na upigaji picha wa ctDNA, CTC, cfRNA na AFP inayohusishwa na exosome au PIVKA-II ina maombi yenye matumaini katika utambuzi wa mapema na ubashiri wa HCC.Hata hivyo, utaratibu halisi wa kutolewa kwa ctDNA katika damu bado haujafafanuliwa.Kufichua sifa za kimsingi za kibayolojia za ctDNA kunaweza kurahisisha matumizi yake kama kialamisho.Kiasi kidogo cha ctDNA katika mzunguko na mahitaji madhubuti ya kushughulikia sampuli ni changamoto kwa utekelezaji wa kimatibabu wa utambuzi wa cDNA katika HCC.Kwa kuongeza, mabadiliko ya kijeni hayana vipengele maalum vinavyoruhusu utambuzi sahihi wa kansa.Kwa kuwa anuwai nyingi za kijeni na za kimaumbile pia zipo katika tishu za kawaida, mabadiliko ya kijeni yanayotambuliwa na biopsy ya maji yanaweza kuwa na manufaa machache katika uchunguzi wa mapema wa HCC.122 Mapungufu ya malengo ya jeni muhimu yaliyofafanuliwa vyema na viambulisho vya viumbe vinavyosaidia kutofautisha cDNA kutoka kwa DNA isiyo ya uvimbe ndio masuala muhimu zaidi katika matumizi ya cDNA.ukosefu wa manufaa ya alama nyeti na maalum kwa ajili ya kutambua CTCs.Seli zinazoweza kutumika tu zilizo na uwezo wa metastatic zilipatikana, na mchanganyiko bora wa vialamisho vilivyoboreshwa vya CSC haukuwa wazi.Kutengwa kwa CTC kwa utamaduni na tathmini ya wasifu wao wa mabadiliko pia ni kazi yenye changamoto.Kwa sababu ya shida za utambuzi, kutengwa na utakaso wa exosomes, utaratibu maalum wa molekuli bado haujaeleweka, na masomo ya hapo awali juu ya utaratibu wa exosomes na HCC hayakuwa ya kina, na jinsi miRNAs, lncRNAs na protini zinavyopangwa katika exosomes. , na haijulikani ikiwa uchukuaji wa exosome ni mchakato maalum wa aina.Matumizi ya exosomes kwa utambuzi na matibabu ya HCC bado iko katika hatua ya mapema.Ukosefu wa kusawazisha taratibu za biopsy ya kioevu, kama vile aina ya mirija inayotumiwa kukusanya damu, kiasi cha damu, kuhifadhi na kugundua sampuli, kutengwa na uboreshaji, kunaweza kuzuia matumizi yake katika mazoezi ya kawaida ya kliniki kwa sababu ya tofauti za mazoea katika vituo vya matibabu.Ufanisi wa biopsy ya kioevu katika uchunguzi wa mapema, uchunguzi, tathmini ya ufanisi, na utabiri wa HCC unasalia kuchunguzwa, hasa kwa makundi yaliyo katika hatari kubwa.Teknolojia ya biopsy ya kioevu ina uwezo mkubwa na inatarajiwa kutumika sana katika mazoezi ya kliniki ya saratani ya ini katika siku za usoni.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL et al.Takwimu za Saratani Ulimwenguni 2020: GLOBOCAN inakadiria matukio na vifo kutoka kwa aina 36 za saratani katika nchi 185.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Makao Makuu ya Tume ya Taifa ya Afya.Vigezo vya utambuzi na matibabu ya saratani ya msingi ya ini (toleo la 2022) [J].Jarida la Magonjwa ya Kliniki ya Ini, 2022, 38(2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Miongozo ya utambuzi na matibabu ya hepatocellular carcinoma (toleo la 2019).Saratani ya ini.2020;9(6):682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Miongozo ya kliniki ya saratani ya hepatocellular: Jumuiya ya Kijapani ya Magonjwa ya Ini, 2017 (miongozo ya 4 ya JSH-HCC), sasisho la 2019.Hifadhi ya Magonjwa ya Ini.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Biopsy ya kioevu katika ugonjwa wa ini wa muda mrefu.Ann Hepato.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Biopsy ya saratani ya matiti ya kioevu: mapitio yaliyolenga.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Ufuatiliaji wa saratani ya hepatocellular: mbinu bora za sasa na maelekezo ya siku zijazo.Gastroenterology.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. Jumuiya ya Utafiti wa Ulaya L, Shirika la Ulaya R, C Tiba.Miongozo ya kliniki EASL-EORTC: matibabu ya saratani ya hepatocellular.J Heparin.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK et al.Uchambuzi wa pamoja wa AFP na HCCR-1 kama viashirio muhimu vya seroloji katika saratani ndogo ya hepatocellular: utafiti unaotarajiwa wa kundi.Dis Mark.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, et al.Usemi tofauti wa plasma microRNA-125b katika ugonjwa wa ini unaohusishwa na virusi vya hepatitis B na uwezo wa utambuzi wa saratani ya hepatocellular inayosababishwa na virusi vya hepatitis B.Hifadhi ya magonjwa ya ini.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Biolojia na umuhimu wa alpha-fetoprotein katika kansa ya hepatocellular.Ini int.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Miongozo ya kliniki ya matibabu ya saratani ya hepatocellular katika eneo la Asia-Pasifiki: sasisho la 2017.Shirika la Kimataifa la Magonjwa ya Ini.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.Thamani ya uchunguzi wa serum PIVKA-II peke yake au pamoja na AFP kwa wagonjwa wa Kichina walio na hepatocellular carcinoma.Dis Mark.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Saratani ya mapafu ya seli isiyo ndogo isiyo ya plasma ya biopsy ya ugiligili: karibu na uvimbe!seli.2020;9(11).doi: 10.3390/seli9112486
15. Mader S, Pantel K. Biopsy ya kioevu: hali ya sasa na matarajio ya baadaye.Matibabu ya Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Biopsy ya saratani ya msingi wa kioevu: zana ya uchunguzi wa multimodal katika oncology ya kliniki.Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Nucleic asidi katika plasma ya binadamu.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Ugunduzi wa hali ya juu wa DNA ya tumor inayozunguka kwa uchambuzi wa ukubwa wa vipande.Sayansi inatafsiri dawa.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Urefu wa kipande cha DNA kinachozunguka.Jeni za PLOS.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. DNA ya uvimbe inayozunguka: alama ya viumbe inayoahidi katika biopsy ya saratani ya kioevu.tumor inayolenga.2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ et al.Kugundua DNA ya tumor inayozunguka katika hatua za mwanzo na za mwisho za magonjwa mabaya ya binadamu.Sayansi inatafsiri dawa.2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Biopsy ya kioevu kwa uchambuzi wa utabiri wa mabadiliko ya saratani dhabiti: mtazamo wa mtaalamu wa magonjwa.J Bioteknolojia.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.Utambuzi wa mapema wa tumor kwa kuzunguka uchunguzi wa DNA ya plasma: hype au matumaini?Sheria ya kliniki ya Ubelgiji.2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Athari ya virusi vya hepatitis na kuzeeka kwenye methylation ya DNA katika hepatocarcinogenesis ya binadamu.Histopatholojia.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647